Entre los componentes de la reacción se incluyen nucleótidos que no tienen un grupo hidroxilo en su extremo 3’(ddNTP), nucleótidos especiales, para poder obtener una terminación específica en las cadenas.
Una vez que el nucleótido especial se incorpora como el residuo terminal, evita que la cadena de ADN sintetizada continúe extendiéndose. La incorporación de los nucleótidos especiales es al azar, de tal forma que se obtienen fragmentos de todos los tamaños posibles que terminan en un residuo específico.
En el método de Sanger (1977), la estrategia es hacer cuatro
reacciones diferentes de síntesis de ADN, utilizando un nucleótido especial distinto en cada tubo. Con la mezcla del nucleótido normal (dNTP) y su terminador (ddNTP), se pueden generar fragmentos complementarios de diferentes tamaños que terminan en el mismo nucleótido. Después, estos fragmentos se pueden separar en un gel de electroforesis con cuatro carriles distintos, para determinar la secuencia del templado.
Una vez que el nucleótido especial se incorpora como el residuo terminal, evita que la cadena de ADN sintetizada continúe extendiéndose. La incorporación de los nucleótidos especiales es al azar, de tal forma que se obtienen fragmentos de todos los tamaños posibles que terminan en un residuo específico.
En el método de Sanger (1977), la estrategia es hacer cuatro
reacciones diferentes de síntesis de ADN, utilizando un nucleótido especial distinto en cada tubo. Con la mezcla del nucleótido normal (dNTP) y su terminador (ddNTP), se pueden generar fragmentos complementarios de diferentes tamaños que terminan en el mismo nucleótido. Después, estos fragmentos se pueden separar en un gel de electroforesis con cuatro carriles distintos, para determinar la secuencia del templado.
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